A549/DDP人肺腺癌耐株介绍:
种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天
培养基:培养条件
F12K培养基(添加NaHCO3 2.5g/L, DDP 1.0mg/L),90%;优质胎牛血清,10%
气相:空气,95%;二氧化碳,5%
温度:37摄氏度
细胞描述:
细胞生长:贴壁生长
细胞形态:上皮细胞样
细胞数量:1×106个
细胞传代:1:3~1:8传代;2~3天换液1次
细胞特性:A549细胞通过DDP间接诱导的方法(DDP起始浓度为1ug/mL,逐级提高DDP浓度,直至细胞能在28ug/mL DDP的培养液中稳定生长
A549/DDP人肺腺癌耐株传代步骤:
如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4.将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。