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LNCap人前列腺癌细胞

LNCap人前列腺癌细胞

简要描述:LNCap人前列腺癌细胞介绍:
种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天
人前列腺癌细胞LNCaP Clone FGC,是1977年从一位50岁白人男性(血型B+)的左锁骨淋巴结针刺活检中分离的,当时该患者已确诊为转移性前列腺癌。根据报道,该细胞对5-α-二氢睾酮(生长调节并生成酸性磷酸酶ACP)有响应。

产品型号: YKLLNCap

所属分类:细胞库

更新时间:2023-11-01

详细说明:

LNCap人前列腺癌细胞介绍:

种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天

细胞传代方法:1:2传代。

细胞形态特性:上皮样;梭形。

有一些细胞是数量多一点比较好生长,生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好,譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞,生长速度非常得快,贴壁速度很快,所以传代时就应该留很少量的细胞,这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长,而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候,细胞形态基本上就会差了,老化的会比较多,对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞,如果细胞形态不好,(或者细胞形态不清晰,表面似有异物等)可以在传代的时候进行如下操作:

先倒掉旧的培养基,加入3ml新的培养基(有无血清的都可)洗涤一次,用滴管吸走,然后再加入3ml的培养基,进行预吹打,控制吹打力度,轻轻地大概沿着瓶底过一遍,然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。(巨噬细胞建议只吹打,不消化)其次,把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内,培养瓶事先加入培养基,放入培养箱内培养,按时间点观察细胞贴壁情况。10分钟观察一次,20分钟,30分钟观察一次。选择一个时间点,已经有部分细胞贴壁的情况下,重新置于洁净台,底面朝上迅速倒出其中的培养基,加入3ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。通常称之为“二传”。如果一次效果还不理想,可重复多次。直到找到细胞上乘形态。其中要注意,结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。

Lncap Cell细胞背景资料:该细胞由HoroszewiczJS于1977年从一名50岁的明确诊断为转移性前列腺癌的白人男性患者的左锁骨上淋巴结细针穿刺的活体组织中分离建立的。

LNCap人前列腺癌细胞冻存的步骤:

1)选择处于对数生长期的细胞,在冻存前一天建议换液。将多个培养瓶中的细胞培养液去掉,用0.25%YDBM消化。适时去掉YDBM,加入少量新培养液。用吸管吸取培养液反复吹打瓶壁上的细胞,使其成为均匀分散的细胞悬液。悬浮生产细胞则不要消化处理。然后将细胞收集于离心管中离心(1000r/min,10钟);

2)去上清液,加入含20%小牛血清的培养基,于4℃预冷15分钟后,逐滴加入已无菌的DMSO或甘油,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,细胞浓度为5*106~1×107/mL之间。(冻存培养液的配置是不是一定要用小牛血清呢?答案是不一定的,具体要看培养的细胞类型来选择;

3)将分装上述细胞悬液于2ml冻存管中,每管0.25ml。冻存管要将盖子盖紧,并标记好细胞名称和冻存日期,同时作好登记(日期、细胞种类及代次、冻存支数);

4)将装好细胞的冻存管放到冻存盒中,-80℃冰箱过夜。如果有程序降温器(放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐)或者可以在4℃,2h;然后转到-20℃,2h;-80℃,2h;放入液氮罐;

5)细胞冻存在液氮中可以长期保存,但为妥善起见,冻存半年后,最好取出一只冻存管细胞复苏培养,观察生长情况,然后再继续冻存。

 

 

 

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