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Calu-3人肺腺癌细胞(胸水)

Calu-3人肺腺癌细胞(胸水)

简要描述:Calu-3人肺腺癌细胞(胸水)
种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天
生长特性:贴壁

组织来源:肺腺癌 (胸水)

培养基:89%IMDM+10%FBS+1%双抗

规格:2X10^6 cells

培养温度:37℃

引种来源:ATCC

传代:1:2~1:4传代,两天左右换液。

产品型号: YKLCalu-3

所属分类:细胞库

更新时间:2023-11-01

详细说明:

Calu-3人肺腺癌细胞(胸水)Calu-3人肺腺癌细胞(胸水)

种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天

收货处理方法:

贴壁生长的细胞:

1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开包装T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。

2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。

4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。

5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。



悬浮生长的细胞:

1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。

2、然后用显微镜观察细胞状态。

3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。

4、平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清。

5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。



培养步骤:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入5mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,补加4-6mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入6cm皿中),培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1、对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2min,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加5ml以上含10%血清的培养基终止消
3.轻轻吹打细胞,脱落后吸出,在1000RPM条件下离心8-10分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4. 按5-6ml/瓶补加培养液,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含5-6 ml培养液的新皿中或者瓶中。
2、对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM条件下离心8-10分钟,弃上清液,补加1-2ml培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或瓶中。
方法三:可选择半数换液方式,弃半数培养基后,将剩余细胞悬起,将细胞悬液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培养基新皿中或者瓶中。
1)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。弃培养基后加入少量YM,细胞变圆脱落后,进行离心收集,1000RPM条件下离心8-10分钟,去除上清,按冻存数量加入到冻存液中。



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