当前位置:网站首页产品展示 > > 细胞库 > YKLNCI-H358NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

产品列表 / products

相关文章 / article

NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

简要描述:NCI-H358人非小细胞肺癌细胞
种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天
超微结构研究表明细胞质中有Clara细胞的特征结构细胞表达主要的肺表面结合蛋白SP-A的蛋白和RNA。不表达SP-B和SP-C。他们在软琼脂中的形成效率为0.83%。

培养条件: RPMI1640(w/oHepes)优质胎牛血清,10%

传代方法: 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。

传代情况: P(121+5)

产品型号: YKLNCI-H358

所属分类:细胞库

更新时间:2023-11-01

详细说明:

NCI-H358人非小细胞肺癌细胞NCI-H358人非小细胞肺癌细胞

传代方法:

产品仅用于科研收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:

1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。

注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。

 

操作要点:

1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。

2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。

4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。

5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。

6)产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。





留言框

  • 产品:

  • 您的单位:

  • 您的姓名:

  • 联系电话:

  • 常用邮箱:

  • 省份:

  • 详细地址:

  • 补充说明:

  • 验证码:

    请输入计算结果(填写阿拉伯数字),如:三加四=7