L02肝细胞

简要描述：L02肝细胞
种属：人；贴壁生长；生长周期：3~4天
疾病特征: 正常

细胞形态: 上皮细胞样

生长特性: 贴壁生长

培 养 基: RPMI-1640,90%;FBS,10%。

生长条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃,

传代方法: 1:2至1:6,每周2次。

产品型号： YKL-L02

所属分类：细胞库

更新时间：2024-04-29

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L02肝细胞

L02肝细胞

疾病特征:         正常

细胞形态:         上皮细胞样

生长特性:         贴壁生长

培 养 基:         RPMI-1640,90%;FBS,10%。

生长条件:         气相:空气,95%;二氧化碳,5%; 温度:37 ℃,

传代方法:         1:2至1:6,每周2次。

冻存条件:         90% 培养基+10% DMSO,液氮储存

支原体检测:       阴性

特点和简介

L-02细胞建系鉴定于1980年。该细胞是一株正常肝细胞系,具有典型的肝细胞形态学特征,可用于多种实验研究。

接受后处理

1) 收到细胞后,请检查是否漏液 ,如果漏液,请拍照片发给我们。

2) 请先在显微镜下确认细胞生长 状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。

3) 弃去T25瓶中的培养基,添加 6ml本公司附带的培养基。

4) 如果细胞密度达80%-90%请及 时进行细胞传代,传代培养用6ml本公司附带的培养基。

5) 接到细胞次日,请检查细胞是 否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。

培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1mYM,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。