GES-1人胃黏膜上皮细胞
GES-1人胃黏膜上皮细胞
运输及保存条件
活细胞常温运输,接收后请立即放入细胞培养箱培养。
冻存细胞干冰运输,接收后请放入液氮中保存,或立即复苏。
细胞特性
来源:胃粘膜。
形态:上皮细胞样。
培养特性:贴壁生长。
支原体、细菌、真菌检测为阴性。
wan全培养液主要成分
DMEM + 10% fetal bovine serum +双抗。
使用方法
细胞复苏
1.从液氮或干冰中取出冻存管迅速放入37℃水浴中,并不时摇动,在1分钟内使其wan全融化。
2.吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量wan全培养液重悬细胞后接种于25 cm2培养瓶中,置37℃,5% CO2细胞培养箱中培养。
细胞传代
1.当细胞长到80%-90%融合时,弃去培养上清,用PBS(不含钙、镁离子)洗细胞1-2次。
2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,当细胞大部分变圆并脱落时,加入1 mlwan全培养液终止消化。
3.轻轻吹打后吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量wan全培养液重悬细胞后按1:3比例接种于25 cm2培养瓶中,置37℃,5% CO2细胞培养箱中培养。
细胞冻存
1.当细胞生长状态良好时,弃去培养上清,用PBS(不含钙、镁离子)洗细胞1-2次。
2.加2 ml 0.05% Trypsin-EDTA于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,当细胞大部分变圆并脱落时,加入1 mlwan全培养液终止消化。
3.轻轻吹打后吸出细胞,800 g/min离心5分钟,弃上清,加入适量冻存液(90% fetalbovine serum + 10% DMSO)后重悬细胞。经逐步降温后转入液氮冻存。
