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人结肠癌细胞;Caco2

人结肠癌细胞;Caco2

简要描述:人结肠癌细胞;Caco2
形态特性上皮样细胞
生长特性贴壁生长
特征特性该细胞系分离自一个原发性直肠癌。 当细胞长满时,表现出典型的肠上皮细胞分化特征。表达维甲酸结合蛋白I和维甲酸结合蛋白II,角蛋白阳性。

产品型号: YADS-C-0029

所属分类:细胞库

更新时间:2023-11-02

详细说明:

人结肠癌细胞;Caco2

人结肠癌细胞;Caco2


形态特性上皮样细胞
生长特性贴壁生长
特征特性该细胞系分离自一个原发性直肠癌。 当细胞长满时,表现出典型的肠上皮细胞分化特征。表达维甲酸结合蛋白I和维甲酸结合蛋白II,角蛋白阳性。
培养条件DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%FBS
传代方法1:2传代;3-4天一次
传代情况PN3
冻存条件基础培养基+8%DMSO+20%FBS
支原体检测荧光法(-)
STRAmelogenin:X;CSF1PO:11;D13S317:11,14;D16S539:12;D18S51:12;D19S433:15;D21S11:30;D2S1338:17,25;D3S1358:17;D5S818:12,13;D7S820:11,12;D8S1179:12;FGA:19;TH01:6;THOX:9,11;vWA:16,18;D3S1358: 17; TH01: 6; D13S317: 11,14; D16S539: 12; D2S1338: 17, 25; D19S433: 15;
同工酶
染色体88-98
使用权限A类

一、准备工作 
    准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。 

二、取材 

    在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器血中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的shou次培养称为原代培养。 理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成年个体的组织容易培养,分化程度低的组织比分化高的容易培养,肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理,尽快培养,因故不能马上培养时,可将组织块切成黄豆般大的小块,置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌,为减少污染可用抗菌素处理。 

三、培养 

    将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养箱中,使细胞尽早进入生长状态。 正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次,观察的内容包括细胞是否生长良好,形态是否正常,有无污染,培养基的PH是否太酸或太碱(由酚红指示剂指示),此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。 原代培养一般有一段潜伏期(数小时到数十天不等),在潜伏期细胞一般不分裂,但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养,将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代"。二倍体细胞一般只能传几十代,而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质,也可能仅有不死性(Immortality)而无恶性。

四、冻存及复苏

    为了保存细胞,特别是不易获得的突变型细胞或细胞株,要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度-196℃,将细胞收集至冻存管中加入含保护剂(一般为二甲亚砜或甘油)的培养基,以一定的冷却速度冻存,最终保存于液氮中。在极低的温度下,细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法,即从液氮中取出冻存管后,立即放入37℃水中,使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。 冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。 

五、常用仪器设备 

    无菌室,超净工作台,三重纯水蒸馏器,抽气泵,压力蒸气消毒器,电热恒温培养箱,培养器具,CO2培养箱,恒温水浴锅,倒置显微镜,离心机,无菌过滤器,洗刷装置,细胞计数板和电子细胞技术仪等等。




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