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人肝癌细胞;SK-HEP-1

人肝癌细胞;SK-HEP-1

简要描述:人肝癌细胞;SK-HEP-1
细胞特性

1) 来源:肿瘤组织

2) 形态:上皮细胞样,半贴壁生长

3) 含量:>1x106

4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

产品型号: YADS-C-0072

所属分类:细胞库

更新时间:2024-04-30

详细说明:

人肝癌细胞;SK-HEP-1

人肝癌细胞;SK-HEP-1

    细胞特性

    1) 来源:肿瘤组织

    2) 形态:上皮细胞样,半贴壁生长

    3) 含量:>1x106

    4) 污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性

    5) 规格:T25瓶或者1mL冻存管包装

    运输和保存

    可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式

    (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;

    (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。

    (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。

    细胞用途:仅供科研使用。        

    细胞接收后的处理:

    1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。

    2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。

    3) 观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。

    4) 贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。

    5) 悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基)。

    6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的wan全培养基来培养细胞。  收到细胞后第一次传代建议1:2传代 。

    细胞培养步骤

    一.培养基及培养冻存条件准备:

    1) 准备McCoy's 5A 培养基;优质胎牛血清,10%;双抗1%。

    2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。

    3) 冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配。

    二. 细胞处理:

    1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。

    2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。

    对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:

    1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。

    2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

    3. 按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。

    4. 将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

    注:第一次传代推荐传代比例为1:2,以后传代比例可根据客户需要自己决定。

    细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。




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