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接收到人子宫颈鳞癌细胞SiHa后,要做哪些处理工作

更新时间:2023-01-18 点击量:362
  1)来源:子宫
  2)形态:上皮细胞样,贴壁生长
  3)含量:>1x106
  4)污染:支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
  5)规格:T25瓶或者1mL冻存管包装
  运输和保存
  可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式
  (1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;
  (2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
  (3)收到细胞后请拍照,3天内如果发现污染,请及时拍照与我们联系。
  人子宫颈鳞癌细胞SiHa接收后的处理:
  1)收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。
  2)在显微镜下确认细胞生长状态时,最好在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给刚收到的细胞拍照,(10×,20×)各2-3张以及培养瓶外观照片一张留存,作为细胞需要售后时提供收到细胞时细胞状态的依据。
  3)观察好细胞状态后,75%酒精消毒瓶壁将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h。
  4)贴壁细胞:在运输过程中贴壁细胞会有脱落的现象,如发现贴壁细胞有脱落或者脱落后抱团生长,可将T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和未贴壁细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到加有按照说明书细胞培养条件新配制的培养基的原培养瓶中(或新的培养瓶中)。
  5)悬浮细胞:T25瓶置于37℃培养箱放置约2-3h,然后抽出瓶中的培养基和细胞1000rpm离心5分钟,弃去上清重悬后接种到新的培养瓶中(加入按照说明书细胞培养条件新配制的培养基)。
  6)备注:运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的培养基来培养细胞。收到细胞后第一次传代建议1:2传代。