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THP-1人单核细胞白血病

THP-1人单核细胞白血病

简要描述:THP-1人单核细胞白血病
种属:人;悬浮生长;生长周期:3~4天
是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。

产品型号: YKLTHP-1

所属分类:细胞库

更新时间:2023-11-01

详细说明:

THP-1人单核细胞白血病THP-1人单核细胞白血病

种属:人;悬浮生长;生长周期:3~4天

细胞培养条件

培养基:RPMI-1640+10%FBS+0.05 mM β-mercaptoethanol+1%P/S

推荐传代比例:1:3-1:6,每2-3天换液一次

培养条件:气相:95%空气+5%CO2,温度:37℃

传代操作

当细胞密度达到约8x10^5cells/ml左右时,即可进行传代。由于是悬浮细胞,可直接将细胞吸出,离心之后传代。传代最少浓度不应少于1x10^5 cells/ml。

去掉培养皿中的培养基,加入PBS进行冲洗,并去上清;

加入YM进行润洗,并去上清;

放入CO2培养箱消化2-4min;

加入培养基终止消化,并吹打均匀。

常见问题及解答

  • 收货时细胞出现伪足,或是碎片较多怎么办?

受到运输影响,悬浮细胞会短暂性出现形态改变的现象,如伪足等。通过传代培养,1周左右可以恢复正常。一些细胞在运输途中死亡而产生碎片,通过传代离心可以去除(见上文传代篇)。

  • 培养过程中细胞发生贴壁怎么办?

少量细胞贴壁属于正常情况,将细胞悬液转移至新瓶中即可。当贴壁细胞的比例高于20%,说明细胞生长环境有异常,需排查培养箱设置、培养基成分,以及培养器皿是否异常。

  • 培养过程中细胞发生聚团怎么办?

少量细胞聚团,呈葡萄串状,属于正常现象,特别是细胞密度较低时,易出现这种情况。更换血清品牌或增大血清比例(不超过20%)有助于解决聚团问题。不建议将聚团的细胞吹散,等待密度高时,会自己分散开。

  • 培养基里一定要加β-巯基乙醇吗?

β-巯基乙醇是一种常用的培养补充剂,有抗氧化的作用,可减少氧化应激对THP-1细胞的影响。当细胞密度过大但需要维持时,可适当增加巯基乙醇的比例(不超过标准量的1.5倍)。

  • 镜下观察时,难以聚焦或估算密度怎么办?

悬浮细胞会随着液体流动,不容易聚焦,静置5-10分钟使细胞沉底,之后在轻轻放上显微镜观察,将有助于聚焦和估算细胞密度。




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