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SK-N-MC人神经上皮瘤细胞

SK-N-MC人神经上皮瘤细胞

简要描述:SK-N-MC人神经上皮瘤细胞
种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天
是由Biedler·J·L建立的两株神经组织来源的细胞中的一株(另一株是SK-N-SH细胞);于1971年9月分离得到。SK-N-MC细胞有中度的多巴胺-β-羟化酶活性,也有可用甲醛诱导荧光指示的细胞内儿茶酚胺。最初被认为是神经母细胞瘤细胞系,但后来被证明来自于Askin肿瘤。

产品型号: YKLSK-N-MC

所属分类:细胞库

更新时间:2023-11-01

详细说明:

SK-N-MC人神经上皮瘤细胞SK-N-MC人神经上皮瘤细胞

种属:人;贴壁生长;生长周期:3~4天

培养条件EMEM+10%FBS
传代方法1:6~1:12传代,每周2~3次换液。
冻存条件无血清细胞冻存液

细胞接收后的处理:
1)收到细胞后,请检查是否漏液,如果漏液,请拍照片发给我们。
2)请先在显微镜下确认细胞生长状态,去掉封口膜并将T25瓶置于37℃培养约2-3h。
3)弃去T25瓶中的培养基,添加6ml新的培养基。
4)如果细胞长满(90%以上)请及时进行细胞传代。
5)接到细胞次日,请检查细胞是否污染,若发现污染或疑似污染,请及时与我们取得联系。
运输和保存:可选择干冰运输及发送复苏存活细胞方式:(1)干冰运输,收到后立即转入液氮或者-80度冰箱冻存或直接复苏;(2)存活细胞,收到后应继续生长,传代达到细胞生长状态良好时,再进行冻存。具体操作见细胞培养步骤。
二.细胞处理:
1)  复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入250px皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。第二天换液并检查细胞密度。
2)  细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于贴壁细胞,传代可参考以下方法:
1.     弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次。
2.     加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化1-2分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。
3.     按6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀。
4 . 收到细胞后传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议客户冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:5的比例进行。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。
下面T25瓶为类;
     1,细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1mlYM,细胞变圆脱落后,加入1ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
     2,4min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10E6/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识。
     3,将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。



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