A9小鼠皮下结缔组织细胞
二、细胞培养操作 | |
| 换液周期 | 2-3天 |
| 培养基体积 | T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml |
| 传代比例 | 1:2-1:4（具体情况视细胞生长速度及密度决定） |
| 传代方法 | 1.尽量吸干净T25瓶原培养基； 2.加3-4ml 常温PBS轻轻润洗细胞10-20s，吸走润洗的PBS； 3.T25瓶加1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶以使胰酶铺匀瓶底细胞层； 4.将培养瓶放入37度培养箱消化； 5.消化到细胞间隙变大，但未wan全脱落时加2-3mlwan全培养基终止胰酶消化； 6.混匀细胞，900rpm离心3-5min，弃上清； 7.加新的wan全培养基轻轻重悬细胞，均匀分到新的培养瓶里； 8.补足wan全培养基，将培养瓶放回培养箱静置培养； |
| 注意事项 | 不同品牌胰酶消化时间差别较大，注意严格控制消化时间 消化传代细胞时吹打细胞注意尽量轻柔，不要产生过多气泡以免影响细胞状态 |
A9小鼠皮下结缔组织细胞
| 组织来源 | 皮下结缔组织；疏松结缔组织和脂肪；正常 |
| 生长特性 | 贴壁细胞 |
| 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
| 细胞类型 | 自发永生化细胞 |
| 生物安全等级 | 1 |
| 生长培养基 | DMEM＋10% FBS＋1% P/S |
| 推荐传代比例 | 1:3-1:4 |
| 推荐换液频率 | 2~3次/周 |
| 冻存条件 | 冻存液：55% 基础培养基+40%FBS+5%DMSO 温度：液氮 |
| 培养条件 | 气相：空气，95%；CO2，5% 温度：37℃ |
| 致瘤性 | Yes, in nude mice. |
| 保藏机构 | ATCC; CCL-1.4 ATCC; CRL-6319 BCRC; 60138 |
