IPEC猪小肠上皮细胞
IPEC猪小肠上皮细胞
种属：猪
生长类型：贴壁生长
生长周期：3-4天
发货周期：1-2周
收货处理方法:
贴壁生长的细胞:
1、贴壁生长的细胞用T25细胞培养瓶发货,收到细胞后,拆开包装T25瓶的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
2、消毒后用显微镜观察细胞状态,并拍下细胞照片。
3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
4、平衡后将T25瓶中培养基吸出用离心管装好备用。
5、如细胞密度高于80%,可以直接消化传代,相反则加入5-6mL培养基放回培养箱继续培养即可。
悬浮生长的细胞:
1、悬浮细胞发货复苏后用离心管发货,拆开包装离心管的自封袋,不拆封口膜,表面喷75%酒精消毒。
2、然后用显微镜观察细胞状态。
3、将细胞放入37度培养箱平衡两小时以上。
4、平衡完成后,离心(1000rpm,3min)收集细胞,弃上清。
5、用新的培养基重悬细胞并接种至培养瓶或皿中,放回培养箱继续培养。
细胞培养常见注意事项:
1、收货时,如不能在收到细胞后及时操作处理细胞,T25及离心管发货的细胞可以消毒后在培养箱过夜,干冰发货的可以在确认干冰未wan全升华时将细胞直接放回液氮或者-80度冰箱,若干冰wan全升华,需即刻复苏细胞;T25瓶及离心管发货的细胞收货后在37度培养箱平衡两小时以上,再开始处理细胞,平衡是为了让细胞尽快适应培养箱环境。
2、部分细胞在运输过程中,由于不断震荡及环境不适,可能导致细胞破碎死亡,从而使培养基中漂浮很多细胞碎片及颗粒状物质。这种情况下,平衡后,贴壁细胞用PBS洗两遍在加新的培养基培养或者传代至新瓶中培养即可;悬浮细胞可以离心(1000rpm,3min)收集细胞,并用PBS重悬后再离心一次,再用新的培养基重悬并接种细胞。<第二次PBS重悬是为了去除碎片,如果平时碎片比较少,传代时可以省略PBS重悬的步骤;如果碎片很多,建议PBS多洗几次。
3、细胞培养,细胞请于细胞培养箱中培养,大部分细胞是37℃,5% CO2,湿度100%环境下培养的。有极少部分细胞培养条件不一致,请仔细阅读相应的细胞说明书,使用正确的培养基及培养条件。细胞于培养瓶或皿中培养,加入适量说明书上标注的细胞相应wan全培养基(一般液面高度2-3mm即可)。
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