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培养人胚肾细胞HEK-293需要注意这些事情

更新时间:2023-02-02 点击量:363
  人胚肾细胞HEK-293是人类胚胎肾细胞,起初由荷兰生物学家AlexVanderEb在1970年代初期分离和培养。VanderEb实验室的博士后FrankGraham用剪切的腺病毒5(Ad5)DNA进行转染。这是他们的第293次实验,所以就命名该细胞系为HEK293,盖细胞系的主要作用是通过细胞的基因改造实现重组蛋白合成。
  使用HEK293细胞有很多优点。它们是一种耐寒、半贴壁、低维护的细胞系,分裂迅速,大约每36小时可以增长1倍。培养的细胞既能用于瞬时和稳定表达,也可悬浮培养或作为单层培养,比较容易转染,并且能够产生大量的重组蛋白。
  
  培养注意事项
  1.HEK293在进行传代培养时,长期培养会导致细胞活力下降,所以培养代数不宜过多,通常培养的代数维持在13代以下,如果选择的细胞系超过20代,需要需要解冻新的细胞重新开始。
  2.实验操作过程中需要注意无菌操作,避免支原体感染,同时做好定时检测。
  3.由于HEK293细胞系的衍生物较多,所以培养时需要根据实验选择合适的细胞系进行培养。
  目前,人胚肾细胞HEK-293主要用于癌症研究、新药开发、抗体蛋白生产、信号转导和蛋白质相互作用研究等领域。